Напишем:


✔ Реферат от 200 руб., от 4 часов
✔ Контрольную от 200 руб., от 4 часов
✔ Курсовую от 500 руб., от 1 дня
✔ Решим задачу от 20 руб., от 4 часов
✔ Дипломную работу от 3000 руб., от 3-х дней
✔ Другие виды работ по договоренности.

Узнать стоимость!

Не интересно!

Выявление клонов чужеродной ДНК по инактивации.

Этот метод может быть использован в случае тех плазмид, которые содержат два или несколько маркеров устойчивости к антибиотикам. Очищенную плазмидную ДНК и ту ДНК, которая должна быть встроена, расщепляют таким рестриктирующим ферментом, который узнает сайт, расположенный внутри гена устойчивости к тетрациклину. Проводят лигирование этих двух ДНК в соответствующих концентрациях и лигированной смесью трансформируют, например, чувствительные к ампициллину клетки Е.coli, так что они становятся устойчивыми к этому антибиотику. Некоторые из колоний, выросших в присутствии ампициллина, будут содержать рекомбинантные плазмиды; другие же будут содержать плазмидную ДНК, которая в процессе лигирования замкнулась в кольцо, не захватив чужеродной ДНК. Чтобы различить эти два типа трансформантов, много колоний наносят штрихами на одинаковые участки чашки с ампициллином и чашки с тетрациклином. Те колонии, которые выживают и вырастают, в присутствии тетрациклина, содержат плазмиды с активным геном устойчивости к тетрациклину. В таких плазмидах нет вставки чужеродной ДНК. Те же колонии, которые вырастают лишь на чашке с ампициллином, содержат плазмиды с неактивными генами устойчивости тетрациклину. В этих плазмидах, вероятно, есть чужеродные последовательности ДНК.

Выявление клонов чужеродной ДНК по инактивации.


Orgy