Напишем:


✔ Реферат от 200 руб., от 4 часов
✔ Контрольную от 200 руб., от 4 часов
✔ Курсовую от 500 руб., от 1 дня
✔ Решим задачу от 20 руб., от 4 часов
✔ Дипломную работу от 3000 руб., от 3-х дней
✔ Другие виды работ по договоренности.

Узнать стоимость!

Не интересно!

Блот-гибридизационный анализ

Саузерн блоттинг — метод, применяемый в молекулярной биологии для выявления определенной последовательности ДНК в образце. Метод Саузерн блоттинга сочетает электрофорез в агарозном геле для фракционирования ДНК с методами переноса разделенной по длине ДНК на мембранный фильтр для гибридизации. Метод называется по имени изобретателя, английского биолога Эдвина Саузерна.

Методика:

2.            Внесите в пакет подогретый до 68 °С раствор для предгибридизации из расчета 0,2 мл на 1 см2 нитроцеллюлозного фильтра. Раствор для предгибридизации содержит 100 мкг/мл денатурированной ДНК из спермы лосося.

4.     Инкубируйте пакет 2—4 ч, погрузив его в водяную баню на 68 °С.

5.            Выньте пакет из водяной бани. Вскройте его, отрезав один угол ножницами. Слейте раствор для предгибридизации как можно полнее.

6.            Пастеровской пипеткой внесите в пакет раствор для гибридизации. Раствор для гибридизации содержит денатурированную ДНК, меченную 32Р (зонд)

7.            Инкубируйте пакет, погруженный в водяную баню на 68 °С, столько времени, сколько необходимо для гибридизации..

Выньте пакет из бани и быстро разрежьте его вдоль трех сторон.

Произвести отмывку фильтра

12.              Высушите фильтр при комнатной температуре на листе бумаги ватман ЗММ.

13.              Заверните фильтр в пленку и экспонируйте его с рентгеновской пленкой для получения радиоавтографов.

 


Orgy